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基于海洋光学HR2进行牛血清白蛋白的吸光度测量

更新时间:2022-12-19      点击次数:819

吸光度是用来衡量光被物质吸收程度的一个物理量。利用光谱技术测量吸光度简便高效,因此被广泛应用于液体和气体的吸光度测量,用于科研分析,还可集成至工业测试系统中。


为了评估新产品Ocean HR2吸光度测量性能,我们在蒸馏水中测量了近30种不同浓度的503mg牛血清白蛋白(BSA通常用作生化应用中的蛋白质浓度标准品)样品。


实验配置


本次实验的配置包括海洋光学Ocean HR2高分辨率光谱仪(190-880 nm)、一个带衰减器的氘钨卤素光源、一对400μm光纤和一个带比色皿支架的石英比色皿以及OceanView操作软件、 OceanDirect二次开发包。

数据及分析


为了确保更好的测量结果,我们首先将光谱仪和光源预热30分钟,使光源处于热平衡状态。此外,为了防止出现误差,我们无需将比色皿从比色皿支架上取下,而是在比色皿中直接进行稀释,使用一次性移液管加入部分样品,然后再加入去离子水混合,并针对每个样品重复该操作过程。

图1.牛血清白蛋白样品在280nm处吸收峰。


我们的测量集中在280nm处的BSA吸光度峰(图1),其吸光度线性为0.999,极限值高达2.5 AU(图2)。这种性能水平将有利于量化大多数类型的蛋白质浓度,所以非常适用于生物方面的应用,包括药物配方的质量监测。

图2.在近30个BSA样品上测得的吸光度线性度高达0.999。


高速平均模式提高信噪比


高速平均模式(HSAM)是通过OceanDirect二次开发包实现的一种基于硬件加强信号的功能,可提高海洋光学光谱仪的信噪比性能。信噪比越高,光谱质量越好,结果越准确。


高速平均模式可以在给定时间段内进行更多次的平均,从而提供更高的信噪比,OceanDirect设备驱动程序可以在200毫秒内处理10,000个平均值,速度提高了10倍。这对于时间要求高的应用和实时应用非常重要,在这些应用中,必须非常快速、准确地做出判断。


总结

高分辨率(<1.0 nm FWHM)

高速采集(1 μs 积分时间)

高信噪比(380: 1)


Ocean HR2 集“三高"于一身的特性,使其成为蛋白质样品浓度测量、分子诊断、制药材料污染物鉴定等多种应用的理想选择。


Ocean HR2 在实验室和生产线上的表现都相当出色,为客户提供科研级光谱仪的性能。既能作为独立设备使用,也可以作为集成设备中的关键子系统或组件。